一、蛋白电泳原理?
原理内容如下所示:
以淀粉胶、琼脂或琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等作为支持介质的区带电泳法称为凝胶电泳。聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持物的一种电泳方法,人为控制聚丙烯酰胺凝胶聚合成孔径的大小,通过类似分子筛的作用把蛋白质分开。它有两种形式:非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)和SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)。
二、蛋白电泳和凝胶电泳的区别?
蛋白质电泳(一般指sds-page)一般使用的都是聚丙烯酰胺凝胶电泳,电泳的驱动力靠与蛋白质结合的sds上所携带的负电荷。
所以相同点就是样品都是带负电荷的,从负极向正极移动,移动的距离都和样品的分子量有关。而且这两个电泳体系可以互相交换使用。进行大分子蛋白质电泳时,可以考虑换用琼脂糖凝胶,因为该体系孔径大。相反,如果需要精确到各位数碱基的dna电泳也可以使用聚丙烯酰胺凝胶系统,因为使用该系统可以将相差一个碱基的两条dna链分开。
不同点首先是样品不同。这个就不用多说了。其次是结果的观察方法不同。dna电泳普遍使用eb做染料,在紫外灯下观察;而蛋白电泳使用的考马斯亮蓝染色,还需要经过脱色步骤,不过观察起来比较简单。还有就是胶体系的差别,dna电泳通常是一胶跑到底,而蛋白质电泳则会有分离胶和浓缩胶之区别。
三、变性蛋白电泳原理?
血清蛋白质为胶体物质,在一定条件下带有电荷,并在电场中泳动。在病理和生理情况下,各种血清蛋白的浓度和组分间的比例可发生改变,因此,血清蛋白的总量和各个蛋白质组份的分析在临床诊断上具有很重要的意义。
蛋白电泳作为一种蛋白质的分析技术,蛋白质在缓冲液中带负电荷和正电荷在电场中向阳极移动称为电泳,不同的蛋白质分子,具有不同的电泳迁移率。
四、蛋白凝胶电泳怎么脱色?
蛋白质凝胶电泳考马斯亮蓝染色后,需要经过脱色液脱色,然后才能看清条带。
五、怎么制作蛋白质电泳胶的干胶啊?我的蛋白电泳?
700kd的我都跑出来过,就用最常规的5%12%就可以,浓缩胶深一厘米,电泳时间是70v8分钟,200v15分钟,转膜我用的伯乐的系统,半干转没试过,湿转200v两小时,因为会过热,所以要在电泳槽里加冰袋,建议用NC膜,pvdf的会有背景
六、蛋白电泳条带怎么分析?
蛋白质电泳条带怎么看 不能严格定量,只能互相比较。 无论什么染色法,条带亮度会随着染液多少及染色时间的不同而变化,无法严格定量。
page的作用更多的是看目的条带的大小,以及两个样品中相同蛋白互相比较多少。不能精确算出是多少ug或ng。
1.直接将带条带的凝胶放在 凝胶呈像系统 中进行定量分析. 2.将所需要的条带剪切下来,用X体积蒸馏水溶解,通过紫外分光光度计在280nm条件下,测定吸光度A值.根据仪器目前标准曲线计算蛋白质浓度,与蒸馏水体积X相乘,得到蛋白质质量. 3.如果样品中含有荧光成分,可以进行荧光分析.
七、蛋白电泳条带分析原理?
蛋白电泳条带分析的原理是以淀粉胶、琼脂或琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等作为支持介质的区带电泳法称为凝胶电泳。聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持物的一种电泳方法,人为控制聚丙烯酰胺凝胶聚合成孔径的大小,通过类似分子筛的作用把蛋白质分开。它有两种形式:非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)和SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)。
八、sds电泳电压是多少?
SDS-PAGE电泳,恒压恒流均可。看个人经验而定,反正是电压越大,蛋白质迁移速率越大。因为上层的浓缩胶,目的是使蛋白变性后在进入分离胶前,能够都在同一起跑线上,低电压跑的慢,可以使蛋白更好的压在同一起跑线上。
电泳时间一般 4~5 h,电压为 40 V 较好,也可用 60 V。
为了加快速度,浓缩胶时用 80-100 V 跑,到分离胶以后用 150-200 跑,结果也不错,总时间 2 h 左右。
九、dna电泳电压多少合适?
看电泳槽多大,两电极直接的距离,每cm 3~5V。例如一个20cm的电泳槽,电压就应该设为60~100V间。电压大,速度就快。还要考虑DNA长度,小片段DNA适宜用比较低的电压。 DNA分子提取得到以后,需要通过电泳技术来检测其数量和质量。自从琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶被引入核酸研究以来,按相对分子质量大小分离DNA的凝胶电泳技术,已经发展成为一种分析鉴定DNA分子的重要实验手段。
琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶电泳是基因操作的核技术之一,它能够用于分离、鉴定和纯化DNA片段。
十、dna跑电泳电压多少?
看电泳槽多大,两电极直接的距离,每cm 3~5V。例如一个20cm的电泳槽,电压就应该设为60~100V间。电压大,速度就快。还要考虑DNA长度,小片段DNA适宜用比较低的电压。
DNA分子提取得到以后,需要通过电泳技术来检测其数量和质量。自从琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶被引入核酸研究以来,按相对分子质量大小分离DNA的凝胶电泳技术,已经发展成为一种分析鉴定DNA分子的重要实验手段。
琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶电泳是基因操作的核技术之一,它能够用于分离、鉴定和纯化DNA片段。